大肠菌和六种致病菌检测试剂盒使用说明

1适用范围：本品适用于食品及水中致病性沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、致泻大肠埃希菌、腊样芽孢杆菌、板奇肠杆菌检测的前期增菌预实验观察以及大肠菌群污染程度的检测。

2方法原理：依据国标GB/T4789.3.4.5.6.7.10.14-2003方法，采用包被技术将相对应培养基包被在试剂盒底部，随时取用。省去了实验前的大量准备工作，方便、快捷。

3样品稀释：同国标法。固体或半固体样品用灭菌生理盐水配制成1:10和1:100的稀释液。液体样品取原液。

4 致病菌检测

4.1加样：用灭菌吸管吸取原液或1:10样品稀释液4ml～10 ml（不得少于4ml）分别加入到标号为1、2、3、A、B、C的增菌格（孔）内。加样后的1、2、3号分别为副溶血弧菌、致泻大肠埃希菌、板奇肠杆菌增菌液；A、B、C分别为金黄色葡萄球菌、沙门菌、腊样芽孢杆菌增菌液。

4.2培养：将加样后的试剂盒盖上盖，平放在36℃±1℃培养箱内培养6～18小时。

4.3 观察结果：如果某致病菌的增菌液发生浑浊，即预示含有此种致病菌。可将浑浊液接种于各相对应的选择性培养基上或接种于相对应的测试片上。置36℃±1℃培养箱内培养，18～24小时观察验证结果。

5大肠菌检测

5.1加样：将试剂盒放在试验台面上，打开盒盖，用灭菌吸管分别吸取3个原液或1:10样品稀释液1ml加到标号为4、5、6的小培养基孔内。另用灭菌吸管分别吸取3个1:10或1:100的样品稀释液1ml加到标号为7、8、9的小培养基孔内，标号为10的小培养基孔内可加入1ml灭菌生理盐水作为培养基阴性对照孔使用。

5.2排气泡：加样后集气窗内如有气泡存在，可将试剂盒以30～45度角倾斜使气泡排出，必要时可轻轻用力在桌面上敲击数下排出气泡。

5.3培养：将加样后的试剂盒盖上盖，平放在36℃±1℃培养箱内培养18～24小时。

5.4观察结果：样液变为黄色为产酸、集气窗中有气泡为产气，产酸产气者为阳性结果，阳性结果的孔数越多，说明污染越严重。

6 注意事项

6.1致病菌检测与大肠菌检测可同时进行；加入样品后不需摇匀；大肠菌检测培养前一定要排气泡，排气泡的方法与结果观察可参见www.bjzw.com网址中大肠菌试剂盒使用说明中的图像显示；在培养箱中取试剂盒时注意平托出来，避免由于试剂盒的倾斜使大肠菌阳性集气窗中的气泡流失而影响结果判断。

6.2试剂盒为一次性无菌包装用品，供一次性即开即用，。

7 保存条件和有效期：避光保存于阴凉干燥处，最佳温度为2～8℃，有效期18个月。

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